中南林學(xué)院05年考研復(fù)試(基因工程原理)考試大綱_跨考網(wǎng)

　　一、考試大綱的性質(zhì)

　　基因工程原理是報(bào)考生物化學(xué)與分子生物學(xué)碩士點(diǎn)的考試科目之一。為幫助考生明確考試復(fù)習(xí)范圍和有關(guān)要求，特制定本考試大綱。

　　二、考試范圍和內(nèi)容

　　第一章 基因與基因工程

　　1、基因研究的發(fā)展

　　了解：基因?qū)W說創(chuàng)立及其研究的發(fā)展

　　2、基因的現(xiàn)代概念

　　掌握：移動(dòng)基因、斷裂基因、假基因、重疊基因等概念

　　3、基因工程的誕生及主要研究內(nèi)容

　　了解：基因工程的誕生與發(fā)展

　　基因工程的定義及主要研究內(nèi)容

　　第二章 基因操作的主要技術(shù)原理

　　1、核酸的凝膠電泳

　　掌握：基因原理

　　了解：瓊脂糖凝膠電泳和脈沖場凝膠電泳

　　2、核酸分子雜交

　　掌握：Southern blotting、Northern blotting、West blotting及原位雜交的原理與方法。

　　3、細(xì)菌轉(zhuǎn)化

　　理解：細(xì)菌轉(zhuǎn)化的概念與方法

　　4、DNA核苷酸序列分析

　　掌握：Sanger雙脫氧鏈終止、Maxam-Gilbert化學(xué)修飾法測序的原理。

　　理解：DNA序列分析的自動(dòng)化和DNA雜交測序的方法。

　　5、基因的化學(xué)合成

　　了解：化學(xué)合成的原理與方法。

　　6、基因的定點(diǎn)誘變

　　掌握：盒式誘變、寡核苷酸誘變、PCR誘變的原理與方法。

　　7、基因的擴(kuò)增

　　掌握：PCR技術(shù)的原理與方法、寡核苷酸引物的概念。

　　了解：PCR技術(shù)的研究應(yīng)用。

　　第三章 基因克隆的酶學(xué)基礎(chǔ)

　　1、核酸內(nèi)切限制酶與DNA分子的體外切割

　　掌握：核酸內(nèi)切限制酶的類型、II型核酸內(nèi)切限制酶的基本特性。

　　了解：影響核酸內(nèi)切酶活性的因素及對DNA的消化作用。

　　2、DNA連接酶與DNA分子的體外連接

　　掌握：DNA連接酶的種類及體外連接的方法。

　　3、DNA聚合酶

　　了解：主要DNA聚合酶的特性與功能。

　　理解：DNA雜交探針的制備。

　　4、DNA及RNA的修飾酶

　　理解：末端轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、T4多核苷酸激酶的特性與功能。

　　5、核酸外切酶

　　了解；核酸外切酶III、核酸外切酶VII的特性與功能。

　　6、單鏈核酸內(nèi)切酶

　　了解：S1核酸酶、Bal31核酸酶的特性與功能。

　　第四章 基因克隆的質(zhì)粒載體

　　1、質(zhì)粒的一般生物學(xué)特性

　　了解：質(zhì)粒的類型、分子的構(gòu)型及質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)移與遷移作用。

　　2、質(zhì)粒DNA的復(fù)制與拷貝數(shù)的控制

　　理解：質(zhì)粒復(fù)制的多樣性

　　3、質(zhì)粒DNA的分離與純化

　　掌握質(zhì)粒DNA分離的方法。

　　4、質(zhì)粒載體的構(gòu)建與類型

　　掌握：質(zhì)粒載體構(gòu)建的必備基本條件

　　理解：表達(dá)型的質(zhì)粒載體。

　　5、重要的質(zhì)粒載體

　　理解：pSC101、pBR322、pUC等重要質(zhì)粒載體的性質(zhì)與功能。

　　第五章 噬菌體載體和柯斯載體

　　1、噬菌體的一般生物學(xué)特性

　　了解：噬菌體的類型、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

　　2、λ噬菌體載體

　　了解：構(gòu)建λ噬菌體載體的基本原理

　　掌握：λ噬菌體載體的主要類型。

　　3、單鏈?zhǔn)删w載體

　　了解：M13噬菌體載體的性質(zhì)與功能。

　　4、柯斯質(zhì)粒載體

　　了解：柯斯質(zhì)粒載體的特點(diǎn)

　　5、噬菌粒載體

　　掌握：噬菌粒載體的概念。

　　了解：pUC118、pUC119

　　第六章 基因的分離與鑒定

　　1、DNA克隆片斷的產(chǎn)生與分離

　　了解：基因組DNA片斷化及富集的方法

　　2、重組體DNA分子的構(gòu)建及導(dǎo)入受體細(xì)胞

　　掌握：外源DNA片斷同載體分子重組的原理與方法。

　　掌握：重組分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法。

　　3、基因克隆的實(shí)驗(yàn)方案

　　掌握：cDNA基因克隆的方法、

　　理解：全基因組文庫克隆

　　了解：基于分子遺傳圖譜的基因定位克隆

　　4、克隆基因的分離

　　理解：核酸探針分離基因的方法

　　掌握：差別雜交、扣除雜交分離基因的原理

　　了解：mRNA差別顯示的原理與基本過程、表達(dá)文庫分離克隆基因

　　5、重組體分子的選擇與鑒定

　　掌握：抗藥性標(biāo)記選擇、β-半乳糖苷酶顯色反應(yīng)選擇法

　　理解：菌落或噬菌斑雜交篩選法、免疫化學(xué)檢測法。

　　第七章 基因的表達(dá)與調(diào)控

　　第八章 植物基因工程

　　1、植物基因克隆與分離

　　了解：植物基因克隆與分離方法

　　2、植物基因工工程研究中常用的基因

　　了解：選擇標(biāo)記基因、報(bào)告基因、抗蟲抗病基因等

　　3、植物基因轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒載體

　　了解：Ti質(zhì)粒的特性、T-DNA的結(jié)構(gòu)與功能

　　理解：Ti質(zhì)粒載的構(gòu)建

　　4、培育轉(zhuǎn)基因植物的方法

　　掌握：農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化法

　　了解：生物彈擊法、花粉管導(dǎo)入法。

　　第九章 動(dòng)物基因工程

　　1、外源DNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的方法

　　了解：磷酸鈣轉(zhuǎn)染技術(shù)、顯微注射技術(shù)、電穿孔技術(shù)、脂質(zhì)體法

　　理解：反轉(zhuǎn)錄病毒感染法

　　三、考試要求

　　考生應(yīng)全面掌握基因工程原理的基本概念，理解主要的原理和基本方法，了解發(fā)展歷史與最新研究動(dòng)態(tài)。綜合運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)和理論解決較復(fù)雜的問題。

　　四、試卷結(jié)構(gòu)

　　基本概念和知識(shí)占30%

　　基本原理和方法占40%

　　綜合運(yùn)用知識(shí)占30%

　　五、考試方式和時(shí)間

　　方式：筆試

　　時(shí)間：3小時(shí)

　　六、參考書

　　基因工程原理（上、下冊），吳乃虎編著（第二版），科學(xué)出版社，1998年（上冊）\2001年（下冊）。